一种褐藻酸裂解酶突变体，所述的褐藻酸裂解酶突变体由野生型褐藻酸裂解酶通过点突变获得，所述的野生型褐藻酸裂解酶氨基酸序列为SEQ ID NO:1；所述的褐藻酸裂解酶突变体的氨基酸序列为SEQ ID NO:本发明提供的褐藻酸裂解酶突变体的蛋白表达量高于野生型褐藻酸裂解酶，1L发酵液分离纯化后可获得700±50mg纯酶，远高现有水平，为褐藻酸裂解酶的工业化生产提供了可能。
本发明涉及一种海洋褐藻酸裂解酶及其表达基因与应用。一种海洋褐藻酸裂解酶基因gc，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述海洋褐藻酸裂解酶基因gc编码的海洋褐藻酸裂解酶GC，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明首次获得了褐藻酸裂解酶GC，并利用结晶的方法得到了褐藻酸裂解酶GC的晶解析了其三维结构。褐藻酸裂解酶GC晶体结构可在工业酶制剂中的底物改造、提高酶活等方面具有广泛的应用前景。
本发明公开了一种褐藻胶裂解酶AlgFP及其制备方法和应用，其中褐藻胶裂解酶AlgFP的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示；其制备方法为将核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的褐藻胶裂解酶基因全合成后，构建至表达载体中，然后导入毕赤酵母细胞，诱导培养并获得分泌表达的褐藻胶裂解酶；该褐藻胶裂解酶可单独用于褐藻酸及其盐类的降解制备褐藻酸寡糖；或者所述褐藻胶裂解酶与其他褐藻胶裂解酶混合使用，协同降解褐藻酸及其盐类本发明获得的褐藻胶裂解酶对褐藻酸钠底物有较高的水解活性，摇瓶发酵产生的粗酶液即具有0.53ml(蛋白质含量约0.015mg)彻底降解1g褐藻酸钠的能力，具有良好的工业应用前景。
本发明提供了一种褐藻胶裂解酶、分泌褐藻胶裂解酶的宿主细胞及其应用，所述褐藻胶裂解酶具有(I)、(II)所示的氨基酸序列中任意一个：(I)SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列；(II)SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列经过1‑20个氨基酸残基的取代、缺失或添加而获得的氨基酸序列，且获得的氨基酸序列具有褐藻胶裂解酶的活性。本发明中，将褐藻胶裂解酶全基因进行截短，降低分子量，显著提高了宿主细胞对褐藻胶裂解酶的表达量，分泌的褐藻胶裂解酶活性高、稳定性好、对褐藻酸钠的降解能力强。
